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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，為了減輕動(dòng)物的疼痛及痛苦，此時(shí)從人道主義的觀點(diǎn)出發(fā)可以對(duì)這些動(dòng)物實(shí)施安樂(lè)死(Euthanasia)。實(shí)施安樂(lè)死時(shí)有一些特殊的要求需要考慮，重要的是安樂(lè)死的方法必須人道。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，有時(shí)為了獲得動(dòng)物組織器官進(jìn)行研究，需要處死動(dòng)物，安樂(lè)死的方法應(yīng)該對(duì)動(dòng)物的組織器官的研究沒(méi)有影響。另外，實(shí)施安樂(lè)死的方法還要可靠、有效、經(jīng)濟(jì)、容易實(shí)施，對(duì)實(shí)驗(yàn)人員必須安全。
本文對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死技術(shù)、《指南》對(duì)我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死處理有什么啟發(fā)和指導(dǎo)作用、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死涉及的福利指標(biāo)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死對(duì)提升動(dòng)物福利倫理作用等內(nèi)容進(jìn)行了詳細(xì)講解。文末附動(dòng)物安樂(lè)死工作工作站購(gòu)買鏈接。
從大的背景來(lái)說(shuō)，當(dāng)時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死的理念在我國(guó)已被逐步認(rèn)可，相關(guān)的法規(guī)要求和標(biāo)準(zhǔn)已逐步發(fā)布；同時(shí)因合作的進(jìn)一步加強(qiáng)，無(wú)論是科研項(xiàng)目合作還是發(fā)表學(xué)術(shù)論文，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi都已成為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理的關(guān)鍵問(wèn)題。但實(shí)際工作中究竟該如何選擇和實(shí)施anlesi才符合國(guó)內(nèi)和要求？這成為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員和科研人員面臨的問(wèn)題。
目前實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi在我國(guó)也開始得到重視，近幾年發(fā)布的多項(xiàng)國(guó)標(biāo)均對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi提出具體要求，包括《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南》（GB/T 35892-2018）、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu) 質(zhì)量和能力的通用要求》（GB/T 27416-2014）、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查技術(shù)規(guī)范》（DB11/T 1734-2020）等。在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)認(rèn)可工作中，所有的機(jī)構(gòu)已將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi作為重點(diǎn)工作落實(shí)，基本可以按照動(dòng)物種類、動(dòng)物年齡及實(shí)驗(yàn)要求等，選擇適合的方式實(shí)施anlesi。國(guó)內(nèi)設(shè)備廠商也開始生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi設(shè)備包括二氧化碳anlesi儀等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi實(shí)施推進(jìn)很快。
與歐美等國(guó)家相比，我國(guó)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死的研究和實(shí)施發(fā)展進(jìn)程方面，仍存在一定差距。美國(guó)、英國(guó)、加拿大等國(guó)家均有專門針對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi的法規(guī)要求、技術(shù)指南，對(duì)anlesi方法的實(shí)施條件、操作細(xì)節(jié)有更嚴(yán)格的規(guī)定和要求，在這方面我國(guó)還存在差距。其次，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi方法的評(píng)估、新安樂(lè)死方法的研究方面，我國(guó)還需進(jìn)一步加強(qiáng)。該部分涉及動(dòng)物痛苦水平的評(píng)估、可用于anlesi藥/物或方法的尋找及安樂(lè)死設(shè)備的研發(fā)等內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi實(shí)施的監(jiān)督需進(jìn)一步加強(qiáng)，包括機(jī)構(gòu)內(nèi)部獸醫(yī)的監(jiān)督、IACUC的監(jiān)督及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理或認(rèn)可機(jī)構(gòu)的檢查。
anlesi是非常重要的動(dòng)物福利指標(biāo)，具體來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi涉及的福利指標(biāo)包括哪些？我國(guó)目前出臺(tái)了哪些與動(dòng)物福利倫理相關(guān)的指導(dǎo)政策或標(biāo)準(zhǔn)？實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi對(duì)提升動(dòng)物福利倫理水平表現(xiàn)在哪些方面？
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂(lè)死涉及的福利指標(biāo)包括以下幾類：動(dòng)物行為研究，包括厭惡感實(shí)驗(yàn)、喜好實(shí)驗(yàn)等；神經(jīng)系統(tǒng)研究，包括監(jiān)測(cè)動(dòng)物腦電圖（EEG）和腦皮層電圖 (ECoG)；觀察動(dòng)物身體反射，如強(qiáng)直-陣攣發(fā)作等；檢測(cè)動(dòng)物生理學(xué)指標(biāo)，包括動(dòng)物心率、血壓和皮質(zhì)醇水平等。
目前我國(guó)出臺(tái)的動(dòng)物福利倫理相關(guān)的指導(dǎo)政策和標(biāo)準(zhǔn)有：《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》（國(guó)科發(fā)財(cái)字〔2006〕398號(hào)）、、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南》（GB/T 35892-2018）、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu) 質(zhì)量和能力的通用要求》（GB/T 27416-2014）、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查技術(shù)規(guī)范》（DB11/T 1734-2020）、《動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終點(diǎn)評(píng)審指南》（RB/T 173-2018）、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物anlesi評(píng)審指南》（待發(fā)布）、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸通用規(guī)范》（待發(fā)布）。
常用的實(shí)施安樂(lè)死的方法可分為兩大類：藥/物化學(xué)法和機(jī)械物理法
1．化學(xué)藥/物法
是指用一種藥/物或其他化合物處死動(dòng)物。常用的是使用過(guò)量的全身麻醉劑，使動(dòng)物心跳停止、呼吸衰竭而死亡。戊巴/比妥相對(duì)來(lái)說(shuō)作用迅速、給藥簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉，是常用的實(shí)施anlesi選擇的藥/物，腹腔或靜脈注射過(guò)量的戊巴/比妥(100～150mg／kg)即可。巴比/妥酸鹽可致血管擴(kuò)張，引起器官淤血，可能影響組織學(xué)研究。
用于安樂(lè)死的吸入麻醉劑有、氟烷、恩氟烷和異氟烷等。CO2也常被用做安樂(lè)死的吸入劑。將動(dòng)物放置含有100％CO2的環(huán)境中，很多種動(dòng)物就產(chǎn)生嚴(yán)重的呼吸困難而死亡。用這種方法處死動(dòng)物時(shí)，動(dòng)物意識(shí)清醒，能感受到痛苦，不是理想的方法。如果將動(dòng)物放置在一定濕度、C02和O2的比例為6：4的混合氣體環(huán)境中，等動(dòng)物逐漸喪失意識(shí)后，將CO2濃度升至100％，在至少保持10min以確定動(dòng)物死亡，這時(shí)，動(dòng)物*是在無(wú)意識(shí)狀態(tài)下死亡的，死亡需30～60min，如果時(shí)間太長(zhǎng)，則不是優(yōu)先的方法。CO2等吸入劑能誘發(fā)動(dòng)物肺水腫，可能影響其后研究中對(duì)動(dòng)物組織器官的利用。
2．機(jī)械物理法
大多數(shù)的藥/物化學(xué)法存在著潛在干擾某些實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可能性，所以利用機(jī)械物理法實(shí)施anlesi可能更適合動(dòng)物處死后利用某些特定的組織器官進(jìn)行生物化學(xué)或組織學(xué)檢查。如果有可能，在應(yīng)用機(jī)械物理法處死動(dòng)物時(shí)，應(yīng)盡可能使用一些鎮(zhèn)/靜劑或麻醉劑。所有的機(jī)械物理法都可能對(duì)動(dòng)物造成痛苦。所以在挑選一種anlesi的方法時(shí)，應(yīng)當(dāng)考慮到這一點(diǎn)。機(jī)械物理法包括斷頭術(shù)(Decapitation)和頸椎脫臼術(shù)(Dislocation of cervical vertebra)。斷頭術(shù)和頸椎脫臼術(shù)適合于小鼠、大鼠、倉(cāng)鼠、沙鼠、小狗、小貓和小鳥，并不適宜于大動(dòng)物。如果機(jī)械物理法能被快速、專業(yè)地完成，就不會(huì)給動(dòng)物帶來(lái)疼痛。實(shí)施機(jī)械物理法后，應(yīng)給動(dòng)物放血或損毀大腦，確保動(dòng)物死亡。
對(duì)于新生的動(dòng)物和體重小于20g的動(dòng)物，可以把它們浸入液氮中迅速冷凍來(lái)實(shí)施anlesi。這種方法能否使動(dòng)物快速喪失意識(shí)還受到一些人的質(zhì)疑。另一種替代方法是對(duì)動(dòng)物的中/樞神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行微波照射，使動(dòng)物立刻死亡，動(dòng)物的組織器官生化特性不發(fā)生改變。如果使用微波，必須有相應(yīng)的設(shè)備。
對(duì)于大型的實(shí)施動(dòng)物，如體型較大的犬、豬、反芻動(dòng)物、馬等，可以先麻醉，使其喪失意識(shí)，然后切斷其頸總動(dòng)脈放血，使之立即死亡。
雖然在今天的科學(xué)技術(shù)下，我們還不得不依靠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)積累臨床經(jīng)驗(yàn)，但我們明白，人和地球上的所有動(dòng)物和諧發(fā)展才是自然賦予地球生命的意義。讓我們對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致以無(wú)限敬意，在心中為它們默默慰問(wèn)。
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